Curso gratis MF1739_3 Procedimientos Experimentales con Órganos Aislados, Tejidos y Células de Animales

OBJETIVOS DEL CURSO GRATIS MF1739_3 PROCEDIMIENTOS EXPERIMENTALES CON ÓRGANOS AISLADOS, TEJIDOS Y CÉLULAS DE ANIMALES

En el ámbito de la agraria, es necesario conocer los diferentes campos de la realización de procedimientos experimentales con animales para investigación y otros fines científicos, dentro del área profesional ganadería. Así, con el presente curso se pretende aportar los conocimientos necesarios para realizar procedimientos experimentales con órganos aislados, tejidos y células de animales.

PRÁCTICAS EN EMPRESA

El curso MF1739_3 Procedimientos Experimentales con Órganos Aislados, Tejidos y Células de Animales dispone de 150 a 250 horas de Prácticas Profesionales en Empresa. Consulta con nuestros asesores de formación la posibilidad de realizar estas Prácticas Profesionales en su Provincia tras la finalización del curso. Las prácticas en empresa son opcionales y no obligatorias.

CONTENIDO DEL CURSO GRATIS MF1739_3 PROCEDIMIENTOS EXPERIMENTALES CON ÓRGANOS AISLADOS, TEJIDOS Y CÉLULAS DE ANIMALES

MÓDULO 1. Procedimientos Experimentales con Órganos Aislados, Tejidos y Células de Animales

UNIDAD DIDÁCTICA 1. CULTIVOS DE CÉLULAS, TEJIDOS Y ÓRGANOS PROCEDENTES DE ANIMALES

1. Histología y fisiología celular básica.
2. - Concepto de morfología y fisiología
3. - Niveles de organización. Relación entre estructura y función
4. - Clasificación de los tejidos
5. Proliferación y diferenciación celular. Adhesión celular.
6. - Concepto de proliferación y diferenciación celular (especialización)
7. - Factores reguladores: Señales endógenas y exógenas
8. - Contacto directo célula-célula. Moléculas de adhesión
9. Tipos de células básicas y características tanto morfológicas como fisiológicas.
10. - Célula procariota: estructura y funciones básicas
11. - Célula eucariota: Organización, estructura y función de los diferentes orgánulos celulares, organización función del núcleo.
12. - Descripción de algunos tipos de células que se suelen utilizar en cultivos celulares: tumorales, epiteliales, Tejido conjuntivo, Tejido muscular, Tejido nervioso, Sangre, tejidos linfoides y Células madre.
13. Métodos alternativos al empleo de animales en investigación
14. - Ventajas de los ensayos in vitro: Ética y legislación, Control del medio extracelular, Homogeneidad de la muestra, Disminución del gasto y tiempo, objetivables y cuantificables, precisión, reproducibilidad, etc.
15. - Limitaciones: Excesiva sensibilidad, Límite de producción, Inestabilidad, Validación del modelo, etc.
16. Obtención de células. Cultivos celulares primarios. Obtención de una línea celular.
17. - Sistemas para la obtención de células: Banco de células o aislamiento a partir de un tejido
18. - Métodos de aislamiento del tejido, disección/disgregación
19. - Requisitos especiales para el cultivo de células primarias
20. - Ventajas e inconvenientes de la utilización de células primarias.
21. - Conservación o mantenimiento células primarias. Requisitos especiales para el cultivo de células primarias.
22. Evolución de las líneas celulares y líneas celulares inmortalizadas. Desarrollo de líneas celulares continuas.
23. - Tipos de líneas celulares establecidas. Células en monocapa y células en suspensión. Células inmortalizadas y transformadas
24. - Preparación de las líneas.
25. - Control de los cultivos celulares (pH, sobrecrecimiento, estado del medio, contaminación, etc. )
26. - Recuento de células. Preparación de células en suspensión y de células adherentes. Uso del hemocitómetro.
27. - Subcultivos de células. Curva de crecimiento.
28. - Métodos para aumentar la producción.
29. - Ventajas y desventajas de la líneas celulares estables
30. Bases de datos y bancos de líneas celulares y material biológico:
31. - Qué es un banco de células
32. - Bancos internacionales más importantes: American Type Culture Collection (ATCC) y European Collection of Cell Cultures (ECACC), etc.
33. - Otros bancos de células: Banco Nacional de Líneas Celulares, etc.
34. Anatomía básica de órganos y tejidos empleados en investigación in vitro.
35. - Órganos y tejidos más comunes: hígado, corazón, riñón, páncreas, branquias, encéfalo, piel, sangre, etc
36. - Ingeniería de tejidos
37. Modelos con órganos y tejidos para procedimientos in vitro:
38. - Cultivo y baños de órganos
39. - Órganos perfundidos
40. - Explantes de órganos
41. - Órganos reconstituidos
42. - Ventajas e inconvenientes de los diversos tipos de modelos in vitro
43. Cultivos de órganos:
44. - Disección de órganos y tejidos para su extracción.
45. - Baños de tejidos y órganos. Equipamiento y medios de conservación
46. - Obtención de explantes. Tamaño de la muestra, Perfusión de la muestra y equipamiento

UNIDAD DIDÁCTICA 2. MANIPULACIÓN DE CULTIVOS CELULARES Y CRIOPRESERVACIÓN

1. Equipos y material empleados en los cultivos de células y su mantenimiento:
2. - Cabinas de flujo laminar: tipos (vertical y horizontal) y nivel de protección (clase I, II y III)
3. - Incubadores: mantenimiento del nivel de CO2, temperatura y humedad
4. - Microscopios: Estándar e invertidos con ópticas de contraste de fases
5. - Frigoríficos, congeladores (de -20º y -80º C) y equipo de criogenia (unidad de almacenamiento en nitrógeno líquido (-196º C) de líneas celulares)
6. - Equipos de esterilización y filtración: autoclaves, esterilización por gas, por calor seco, sistema de filtración, purificación de agua, etc.
7. - Otros instrumentos: Balanzas, Baño termostático, centrífugas refrigeradas y no refrigeradas, Equipos de purificación de agua, Micropipetas de volumen variable o de volumen fijo, pHmetro, Pipeteadores automáticos
8. - Recipientes para cultivos: Placas de Petri, Multiplacas, Frascos de Roux de diferentes formas y tamaños o Especiales, como las «roller bottles» o con portaobjetos
9. Protocolos de trabajo en cabina de flujo laminar y en poyata de laboratorio.
10. - Inicio del trabajo en cabina: encendido y puesta a punto de la cabina, desinfección y recomendaciones para el trabajador.
11. - Durante la manipulación: distribución del material y utilización de la zona de trabajo, control del flujo y turbulencias de aire, actuación ante un vertido de material contaminado y alarmas.
12. - Al finalizar el trabajo: Limpieza, vaciado de material, apagado y cerrado de la cabina
13. - Mantenimiento: semanal (limpieza y desinfección de superficie y paredes, mensualmente (revisión de válvulas interiores) y anualmente se certificará por una entidad cualificada.
14. - Mesa de trabajo o poyata de laboratorio: orden, limpieza y desinfección
15. Protocolos de manejo de placas de cultivos.
16. - Apertura del material estéril dentro de la cabina
17. - Marcaje de las placas en la tapa y en un lateral de la base, de manera distinta para cada placa, para evitar intercambiar tapas.
18. - Toma del medio con la pipeta y transferencia a la placa entreabierta (no retirar la tapa)
19. - Tratamiento como residuo según riesgo biológico del cultivo
20. Áreas de un laboratorio de cultivo de tejidos.
21. - Área de preparación de medios: equipamiento
22. - Área de limpieza y esterilización: dimensiones mínimas, organización y equipamiento (máquinas de lavado de material y esterilizadores)
23. - Área de transferencia: cabina de flujo laminar/seguridad biológica y otros equipos
24. - Área de incubación o cámaras de crecimiento: control de iluminación, temperatura y humedad. Alarmas
25. Lavado, esterilización y preparación de materiales:
26. - Vidrio: pipetas, probetas, vasos, matraces y botellas de vidrio para preparación, almacenamiento y clasificación de medios y reactivos
27. - Plástico: Cultivos en placas y botellas, tubos de ensayo para diferentes técnicas y preparación de alícuotas de los reactivos
28. - Lavado, preparación y esterilización del material: área específica del laboratorio, con el método y desinfectantes adecuados
29. - Métodos de esterilización: Calor directo, flameado; Calor seco, Horno Pasteur y Calor Húmedo, Autoclave
30. Contaminaciones cruzadas y microbiológicas y su prevención.
31. - Principales contaminantes: microorganismos, otras líneas celulares del laboratorio y contaminación química
32. - Fuentes de la contaminación accidental: origen del cultivo tejido o células, proceso de manipulación del cultivo, empleo de reactivos biológicos contaminados, material contaminado y ambiente de trabajo
33. - Prevención para evitar contaminaciones: obtener siempre los cultivos de centros reconocidos que certifiquen el origen; trabajar bajo unas correctas normas de trabajo, limpieza y esterilidad, utilización de Inhibidores del crecimiento de los contaminantes (antibióticos y antifúngicos), etc.
34. Características y naturaleza del sustrato en cultivos celulares.
35. - Tipos de sustratos
36. - Factores de adhesión celular
37. - Interacciones células-substrato: Medios semisólidos: matrices.
38. - Métodos de disgregación celular: mecánicos, químicos y enzimáticos
39. Medios y reactivos de cultivo celular. Características principales, preparación y renovación
40. - Características de los medios de cultivo celular: composición, osmoralidad, viscosidad, tensión superficial, especificidad, pH, capacidad tamponadora, esterilidad, etc.
41. - Componentes y suplementos: Agua, sales, glucosa, aminoácidos y vitaminas. Suero, factores de crecimiento y otros suplementos específicos. Indicador de pH. Pautas par el suplemento con antibioticos
42. - Tipos de medios. Medios libres de suero.
43. - Opciones para la elección, en polvo, líquido concentrado o listo para usar
44. - Preparación de medios líquidos, a partir de polvo (filtración) o esterilizados en autoclave
45. - Opciones para la elección, en polvo, líquido concentrado o listo para usar
46. - Preparación de medios líquidos, a partir de polvo (filtración), concentrados o esterilizables en autoclave
47. Factores de crecimiento y supervivencia de células en cultivo.
48. - Hormonas y factores de crecimiento
49. - Suero. tipos; suero de ternera (CF), suero bovino fetal (FCS) el suero de caballo (HS) y suero humano (HuS). Sustitutivos del suero
50. - Factores que afectan a la supervivencia de las células en un cultivo
51. Técnicas de mantenimiento de células en cultivo. Criopreservación de líneas celulares y métodos de identificación. Productos de criopreservación celular.
52. - Proceso de almacenamiento por congelación con agentes crioconservantes (glicerol, DMSO, etc...)
53. - Disminución progresiva de temperaturas hasta utilizar depósitos con nitrógeno líquido. Sistemas automáticos para la reducción progresiva y controlada de la temperatura.
54. - Factores que se favorecen con la criopreservación
55. - Identificación: Datos mínimos de indentificación de cada vial
56. - Procedimiento de descongelación
57. Empleo de cultivos celulares con fines experimentales. Detección de actividad metabólica y toxicológica.
58. - Aplicaciones: estudio de las propias células, clonación, el cáncer, biología del desarrollo, investigación en biología celular y bioquímica, en farmacología y toxicología, obtención de anticuerpos u hormonas, técnicas diagnósticas, etc.
59. - Ventajas de la utilización de cultivos celulares en el campo de la toxicidad
60. - Limitaciones de los ensayos in Vitro para estudios de toxicidad
61. - Ensayos utilizados en pruebas de citotoxicidad: Pruebas citológicas: observación al microscopio, Pruebas bioquímicas. Pruebas de viabilidad (de respuesta inmediata o de corto plazo y de respuesta a largo plazo o de supervivencia)
62. - Células asesinas
63. - Requisitos de las pruebas de citotoxicidad
64. - Preparación de las células efectoras y diana
65. - Prueba de citotoxicidad
66. - Resultados e interpretación

UNIDAD DIDÁCTICA 3. PROCEDIMIENTOS EXPERIMENTALES CON ÓRGANOS AISLADOS, TEJIDOS Y CÉLULAS ANIMALES

1. Experimentos con cultivos de tejidos de origen animal mediante su exposición a sustancias o elementos terapéuticos o tóxicos.
2. - Estudios del efecto de diferentes sustancias en cultivos con tejidos y órganos diana. Aplicaciones
3. - Estudios del efecto de diferentes sustancias en cultivos de células (primarias o líneas establecidas). Aplicaciones
4. Técnicas de valoración del crecimiento y la viabilidad celular.
5. - Rojo neutro
6. - Prueba MTT
7. - Liberación al medio de la láctico deshidrogenasa (LDH)
8. - Ensayos de fluorescencia
9. - Toxicidad relativa: (concentración efectiva en el 50 % de las células)
10. Recolección de células y sus productos.
11. - Recolección de las células de los cultivos: centrifugación continua o filtración y extracción en régimen continuo
12. - Sistemas cromatográficos para el aislamiento y purificación de las toxinas. Equipos relacionados
13. Prevención de riesgos laborales en la manipulación de órganos, tejidos y células.
14. - Principales riesgos biológicos
15. - Evaluación de riesgos: Propiedades intrínsecas del cultivo celular, como resultado de la modificación genética, como resultado de una infección con agentes patógenos. Condiciones de trabajo
16. - Normas de trabajo en los laboratorios de cultivos celulares

UNIDAD DIDÁCTICA 4. INSTRUMENTACIÓN Y MÉTODOS DE REGISTRO DE SEÑALES A PARTIR DE ÓRGANOS AISLADOS, TEJIDOS Y CÉLULAS ANIMALES

1. Procesamiento de señales:
2. - Esquema general: transductor, amplificador y sistema de registro
3. - Equipos de espectroscopia de Bioimpedancia eléctrica
4. - Equipos de medida de la biomasa
5. Transductores: de fuerza, de presión, de temperatura.
6. Electrodos para biopotenciales y bioquímicos.
7. Ruidos en la salida de datos y métodos de filtrado.
8. Programas informáticos de recogida de datos.

MATERIAL INCLUIDO EN LA MODALIDAD A DISTANCIA

• Manual teórico: MF1739_3 Procedimientos Experimentales con Órganos Aislados, Tejidos y Células de Animales
• Cuaderno de ejercicios: MF1739_3 Procedimientos Experimentales con Órganos Aislados, Tejidos y Células de Animales